Nečistoće semaglutida

Nečistoće semaglutida|Kontrola nečistoće simeglutida|Prilagođena sinteza nečistoća i potvrda strukture|Znanstveni-peptid

Soma Lutide (Simeglutide) kontrola nečistoća - za GLP-1 studija kvalitete lijeka, podnošenje generičkih lijekova. Znanost-Peptide pruža prilagođenu sintezu nečistoća povezanih sa Soma Lutidom, uključujući peptide koji nedostaju, oksidirane nečistoće, proizvode eksfolijacije masnih kiselina, nečistoće povezane s PEG lancem, itd., popraćene podacima o strukturnoj potvrdi. Možemo podržati vaše istraživanje profila nečistoća. Dobrodošli da nas kontaktirate.

Semaglutid (također poznat kao Semaglutide) ovih je godina bio u vatri. Novo Nordisk se oslanja na njega kako bi tržišnu vrijednost gurnuo na drugo mjesto u svijetu, domaći proizvođači peptidnih generičkih proizvoda gotovo da nitko ne bulji u njega. Oralni oblici doziranja i oblici doziranja za injekcije velika su tržišta. Nakon isteka patenta, tko može prvi napraviti kvalitetno istraživanje, tko će imati priliku zgrabiti prvi generik.

 

Međutim, ispitivanje kvalitete somatostatina je, iskreno govoreći, teže od proučavanja mnogih peptida. To je 31-peptid s lancem masne kiseline (oktadekandioična kiselina) i PEG veznikom. Ova struktura određuje da je njegov spektar nečistoća posebno bogat - nedostajućim peptidima, oksidiranim nečistoćama, produktima odvajanja masnih kiselina, nečistoćama povezanim s PEG lancem, dimeri moraju imati kontrolu, svaki mora biti čist. Osobito je PEG lanac, koji se ne nalazi u običnim peptidima, jedinstven za Somalutide.

 

Prikupili smo puno iskustva u sintezi složenih peptidnih nečistoća. Specijalizirali smo se za proučavanje somatostatina i znamo koje su poteškoće u njegovom profilu nečistoća i koje su bitne kontrolne stavke. Možemo prilagoditi sintezu različitih kontrola nečistoća semaglutida u skladu s vašim potrebama, s podacima o strukturnoj potvrdi i pomoći vam da uspostavite metodu, tako da je manja vjerojatnost da će vam se izdati dodatak prilikom podnošenja.

Molekularna struktura somatostatina određuje da je njegov profil nečistoća mnogo složeniji od profila običnih peptida. Kada radimo studije nečistoća, uglavnom se fokusiramo na ove kategorije:

Nedostaje peptid
31 aminokiselina, od kojih bilo koja nedostaje tijekom procesa sinteze, je nečistoća. Vremena zadržavanja nedostajućih peptida na HPLC-u bila su široko raspoređena, s različitim polaritetima nedostajućih peptida na različitim položajima. Neki nedostaju na N-kraju, neki u sredini, a neki blizu mjesta vezanja masne kiseline. Primili smo narudžbu od kupca koji je tražio desetak nedostajućih peptida na različitim pozicijama kako bi locirao sve moguće nečistoće koje nedostaju u njihovom procesu.

Oksidirajuće nečistoće
Somalutid ima metionin (Met) u svojoj sekvenci, koji je osjetljiv na oksidaciju u sulfoksid, a zatim u sulfon. Oksidirane nečistoće često se pojavljuju u studijama stabilnosti i rastu nakon određenog vremena. Napravili smo usporedbu, pod ubrzanim uvjetima tijekom mjesec dana, vrh oksidacije može narasti na više od 0,3%, bez kontrole.

Proizvodi za izbacivanje masnih kiselina
Bočni lanac masne kiseline (oktadekandioična kiselina) somatostatina vezan je za lizin preko poveznice, a ova se modifikacija može djelomično odvojiti tijekom sinteze ili skladištenja. Što je još problematičnije, odvajanje se može dogoditi na različitim mjestima - između masne kiseline i poveznice te između poveznice i peptida - što rezultira različitim nečistoćama. Sintetizirali smo nekoliko nečistoća-povezanih s masnim kiselinama za naše klijente, u rasponu od potpunog odvajanja do samo malog dijela.

Nečistoće-povezane s PEG lancem
Ovo je najspecifičnija vrsta nečistoće u somatostatinu. Ima PEG (polietilen glikol) poveznicu, a PEG lanac se može prekinuti, skratiti ili polimerizirati tijekom sinteze, što rezultira nizom srodnih nečistoća. Te se nečistoće ne nalaze u običnim peptidima, već su jedinstvene za somatostatin i teško ih je proučavati u studijama kvalitete. Napravili smo razne varijante delecije PEG lanca, skraćivanja PEG lanca i oksidacije PEG lanca.

Dimeri/polimeri
Dvije ili više molekula somatostatina grupiraju se u dimer ili više. Molekularna težina dimera dvostruko je veća od glavnog vrha, a često je široki vrh na HPLC-u, pa ga je potrebno posebno odvojiti i pročistiti prije nego što se može koristiti kao kontrola. Radili smo pripremu dimera, a bilo je potrebno nekoliko ciklusa pročišćavanja da bi se postigla čistoća veća od 95%.

Deamidirane nečistoće
Asparagin (Asn) i glutamin (Gln) lako se deamidiraju u kiselim uvjetima ili uvjetima zagrijavanja, što rezultira izomerima. Postoji nekoliko Asn i Gln u nizu somatostatina, a nečistoća deamidacije često se pojavljuje u testu prisilne razgradnje, pa se kontrolni proizvod mora koristiti za lociranje nečistoće.

Dijastereoizomeri
Tijekom dugolančane sinteze, pojedinačne aminokiseline mogu proći racemizaciju, što rezultira dijastereoizomerima. Sadržaj ove vrste nečistoća obično nije visok, no stručnjaci će se pitati prilikom deklariranja, a za potvrdu je bolje imati kontrolni proizvod.

Mnoge od tih nečistoća ne mogu se kupiti i moraju se sintetizirati po narudžbi. Već smo napravili puno projekata na prilagođavanju nečistoća somatostatina, pokrivajući sve gore navedene kategorije.

Brisanje niza peptida
We synthesize whatever is missing. For example, the lysine at position 20 is missing, or the amino acid near the fatty acid attachment site is missing. We will synthesize according to your process impurity profile, and the purity is usually >95%, s MS i NMR potvrdom. Sintetizirali smo skup peptida s razmakom od 5 aminokiselina od N-terminala do C-terminala.

Oksidirajuće nečistoće
Met in Somatostatin is oxidized to sulfoxide or sulfone, and we can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. We can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. The purity of the product is >95%, a možemo osigurati LC-MS spektar za potvrdu stupnja oksidacije. Sulfoksid i sulfon se odvajaju HPLC-om, a možemo oboje.

Proizvodi za izbacivanje masnih kiselina
Ovo je glavni fokus Somalutide nečistoća. Lanac masne kiseline može biti potpuno ili djelomično pomaknut. Možemo sintetizirati niz varijanti za različite položaje osipanja. U jednom od najsloženijih projekata koje smo ikada radili, kupac nas je zamolio da sintetiziramo nečistoću kojoj nedostaje 6 ugljika u lancu masne kiseline, a trebalo nam je dva mjeseca da to ispravimo.

Nečistoće-povezane s PEG lancem
Ovo je jedna od najtežih nečistoća somatostatina, a ujedno je i naša snaga. PEG lanac može nedostajati, biti skraćen, prekinut, oksidiran, a mogu se proizvesti razne varijante. Napravili smo nečistoću s potpunim nedostatkom PEG lanca (tj. de-PEGilirani somatostatin), varijantu s prepolovljenom duljinom PEG lanca i proizvod s oksidiranim PEG lancem. Kupac je dobio ove kontrole i spektar nečistoća povezanih s PEG-u potpunosti je utvrđen.

Dimer
Dimeri nastali unakrsno-vezivanjem ili ne-kovalentnim interakcijama mogu se pripremiti različitim metodama te izolirati i pročistiti kako bi se dobile kontrole visoke čistoće. Dimere je teško pročistiti, ali mi imamo iskustvo da znamo kako odvojiti monomere.

Deamidirane nečistoće
Za mjesta Asn i Gln u nizu, možemo pripremiti deamidirane kontrole nečistoća prisilnom razgradnjom ili ciljanom sintezom. Razlika u molekularnoj težini nakon deamidacije je samo 1, što nije lako razlučiti pomoću MS, pa obično koristimo NMR ili posebne kromatografske uvjete za potvrdu.

Dther prilagođene nečistoće
Ako u svom istraživanju pronađete novu nepoznatu nečistoću, možemo vam pomoći analizirati strukturu i sintetizirati je. Pošaljite nam uzorak, mi ćemo napraviti LC-MS analizu, nagađati strukturu, zatim usmjerenu sintezu, a zatim usporediti vrijeme zadržavanja i maseni spektar da potvrdimo dogovor. Proveli smo ovaj proces mnogo puta i stopa uspješnosti je prilično visoka.

Razvoj i validacija analitičke metode
Prilikom postavljanja HPLC ili LC-MS metode potrebna je kontrola nečistoća za lokalizaciju, određivanje odvajanja, provjeru linearnog raspona i oporavak. Bez kontrole, validaciji metode nedostaje dio. Mnogi klijenti od nas traže da prvo napravimo nekoliko ključnih nečistoća kako bismo postavili metodu, a zatim polako nadoknadimo ostatak.

Heterogena masena spektrometrija
Prilikom deklariranja generičkog lijeka potrebna je sveobuhvatna kvalitativna i kvantitativna analiza procesnih nečistoća i produkata razgradnje. Mjesto, sadržaj i strukturu svake nečistoće potrebno je potvrditi kontrolnim proizvodom. Vidjeli smo da je deklaracija informacija poslana da se nadoknadi, devet puta od deset nečistoća ovog djela nije razumjela.

Studije stabilnosti
U-testima dugoročne stabilnosti i ubrzanim testovima potrebno je utvrditi koji su produkti razgradnje dominantni i kakav je trend sadržaja. Pomoću kontrole nečistoća moguće je točno kvantificirati i pratiti. Kupac je ispitivao stabilnost pripravka somatostatina i otkrio je da vršna vrijednost razgradnje brzo raste pod ubrzanim uvjetima, pa smo to analizirali pomoću MS-a i sintetizirali kako bismo potvrdili strukturu, a zatim je kupac osjetio olakšanje i to prijavio.

Testiranje puštanja serije
Nakon komercijalizacije, svaku seriju API-ja ili formulaciju treba ispitati na predmetnu tvar. Kontrole nečistoća ključni su alati za ispitivanje otpuštanja.

Podaci o generičkim deklaracijama lijekova
Studije nečistoća ključni su dio podataka o podnošenju. Pružanje cjelovitog profila nečistoća i kontrolnih podataka značajno smanjuje rizik od ponovnog izdavanja.

Slučaj 1: Farmaceutska tvrtka, program generičkih lijekova Somalutide
Oni razvijaju generičku verziju somatostatina i trebaju kompletan set kontrola nečistoća za validaciju metode. Za njih smo prilagodili 15 nečistoća: 6 nedostajućih peptida, 2 oksidirane nečistoće, 1 dimer, 2 proizvoda za eksfolijaciju masnih kiselina, 3 nečistoće povezane s PEG lancem i 1 nečistoću deamidacije. Čistoća svakog bila je iznad 95%, s MS i NMR podacima. Voditelj projekta je rekao: "Nečistoće Somalutida su kompliciranije od drugih peptida, posebno PEG-a, koji smo tražili od brojnih tvrtki, ali sve su rekle da to ne mogu učiniti. Ali uspjeli ste učiniti sve, a podaci su bili potpuni, što je bila velika pomoć." Naknadno je uspješno završena validacija njihove metode i sada se pripremaju za arhiviranje.

Slučaj 2: CRO, posebna studija o nečistoćama u PEG lancu
Poduzeli su kvalitetan istraživački projekt o somatostatinu, koji je zahtijevao sveobuhvatnu analizu nečistoća povezanih s PEG lancem. Sustavno smo sintetizirali nečistoće povezane s PEG-: potpuni nedostatak PEG lanca, prepolovljena duljina PEG lanca, oksidacija krajeva PEG lanca i lomljenje PEG lanca na dva dijela. sintetizirao je ukupno 8 PEG-srodnih nečistoća. Klijent je upotrijebio te kontrole kako bi uspostavio kompletan skup metoda detekcije nečistoća PEG-a, što je postalo vrhunac njihovih podataka za arhiviranje.

Slučaj 3: Studije stabilnosti, biotehnološka tvrtka
Provodili su studiju stabilnosti formulacije somatostatina i otkrili da se sadržaj produkta razgradnje brzo povećava u ubrzanim uvjetima, ali nisu znali o čemu se radi. Uzorak smo analizirali pomoću LC-MS, pretpostavili da se radi o nečistoći koja luči masnu kiselinu na određenom mjestu, a zatim ga ciljano sintetizirali i potvrdili usporedbom. Uspostavili su test koristeći ovu kontrolu i točno pratili trend ovog proizvoda razgradnje. Kasnije, pri podnošenju izvješća, ovaj dio podataka su vještaci istaknuli, a zbog solidnih podataka nije izdana naknada.

Somatostatin je super popularan proizvod, ali proučavanje nečistoća je delikatan posao, posebno nečistoća povezanih s PEG lancem i proizvoda za eksfolijaciju masnih kiselina, s kojima se mnogi proizvođači ne mogu nositi. Ako provodite kvalitetno istraživanje ili generički razvoj somatostatina i trebate kontrolu nečistoća, dobrodošli da razgovarate s nama. Puno smo radili, znamo koje su poteškoće i znamo kako ih izvući.