Retatrutidne nečistoće

Retatrutidne nečistoće|Referenca nečistoća ritaglutida|Prilagođena sinteza nečistoća i provjera strukture|Znanstveni-peptid

Kontrole nečistoća ritaglutida - za razvoj analitičke metode, studije kvalitete, podnošenje generičkih lijekova u znanost-Peptide pruža prilagođenu sintezu nečistoća povezanih s ritaglutidom, uključujući peptide koji nedostaju, oksidirane nečistoće, ispadanje masnih kiselina, dimere itd., sa podacima o strukturnoj potvrdi za podršku vašim studijama profiliranja nečistoća. Dobrodošli da nas kontaktirate. Dobrodošli da nas kontaktirate.

Retatrutide nečistoće (Retatrutide) je u posljednje dvije godine bio na vatri, GLP-1/GIP/glukagon tri-agonist, a njegov učinak mršavljenja još je jači od učinka simeoglutida. Domaće peptidne generičke kompanije bulje u to, patent je pred istekom, tko prvi zgrabi prvi generik, tko će moći pojesti veliki dio tržišta.

 

Međutim, za proizvodnju generičkih lijekova ključna je kvalitetna istraživanja. Analiza spektra nečistoća, proizvodi za kontrolu nečistoća, validacija metode, ništa od toga ne smije nedostajati u podacima za arhiviranje. Retarotid je veliki peptid s 39 aminokiselina i dva bočna lanca masnih kiselina. Proces sinteze može proizvesti više nečistoća nego obični peptidi - peptidi koji nedostaju, oksidirane nečistoće, dimeri, proizvodi odvajanja masnih kiselina, od kojih se svaki mora razjasniti.

 

Mi u Science-Peptideu prikupili smo puno iskustva u sintetiziranju složenih peptidnih nečistoća. Imamo set procesa pripreme nečistoća posebno za dugolančane modificirane peptide kao što je ritaglutid. Možemo prilagoditi sintezu različitih kontrola nečistoća ritaglutida prema vašim potrebama, s podacima o strukturnoj potvrdi i pomoći vam da uspostavite metodu, tako da ćete imati jasnu predodžbu prilikom podnošenja.

Ritaglutid je velika molekula, proces sinteze je složen, a izvor nečistoća je također složen. Kada radimo studije nečistoća, uglavnom se fokusiramo na ove kategorije:

Nedostaje peptid
Ne-spajanje jedne ili nekoliko aminokiselina tijekom sinteze najčešća je nečistoća u procesu. Različiti položaji peptida koji nedostaje imaju različit polaritet i potrebno ih je lokalizirati na HPLC. Na primjer, ako nedostaje lizin na poziciji 15, ili ako nedostaje aminokiselina na kraju lanca masne kiseline, vrijeme zadržavanja je sasvim drugačije, ali bez kontrole, ne znate koji je vrh.

Oksidirajuće nečistoće
Met se lako oksidira u sulfoksid, što mijenja njegov polaritet i utječe na test čistoće. Budući da je Met prisutan u nizu retarotida, oksidirana nečistoća bitna je kontrolna stavka. Ponekad će se oksidirani vrhovi pojaviti nakon nekog vremena, pa moramo paziti na to.

Dimeri/polimeri
Tijekom sinteze ili skladištenja, dvije ili više molekula spojene su disulfidnim vezama ili ne-kovalentnim interakcijama i ključne su nečistoće u tvari. Udvostručenje molekulske težine dimera često je veliki vrh na HPLC-u i mora se kontrolirati.

Proizvodi za izbacivanje masnih kiselina
Retarotid nosi dva bočna lanca masne kiseline (npr. oktadekandioičnu kiselinu), a ova se modifikacija može djelomično ukloniti tijekom sinteze ili skladištenja, što rezultira nečistoćama koje-uklanja masna kiselina. Struktura ove vrste nečistoće toliko je različita od glavnog vrha da je potrebna specijalizirana kontrola kako bi se locirala. Susreli smo kupca koji je radio studije stabilnosti, nakon mjesec dana skladištenja pojavio se vrh, a zatim smo otkrili da je masna kiselina pala s pola vrha.

Deamidirane nečistoće
Asparagin (Asn) i glutamin (Gln) lako se deamidiraju pod kiselim ili grijanim uvjetima kako bi se proizveli izomeri. Te se nečistoće često nalaze u testovima prisilne razgradnje i treba ih kontrolirati.

Dijastereoizomeri
Tijekom dugo{0}}lančane sinteze, pojedinačne aminokiseline mogu biti podvrgnute racemizaciji, što rezultira dijastereoizomerima, koje je potrebno detektirati kiralnom kromatografijom ili posebnim metodama. Iako sadržaj obično nije visok, stručnjaci će se za njega raspitati kada se deklarira.

Mnoge od tih nečistoća nisu dostupne na tržištu i potrebno ih je sintetizirati po narudžbi. Napravili smo mnogo projekata na prilagodbi nečistoća ritaglutida i pokrili smo gore navedene kategorije.

Brisanje niza peptida
We synthesize whatever is missing. For example, the lysine at position 15 is missing, or the amino acid at the end of the fatty acid chain is missing. We can synthesize them according to your impurity profile, and the purity is usually >95% s MS-om. Kupac nas je zamolio da sintetiziramo set od 12 peptida koji nedostaju od N-terminala do C-terminala, i napravili smo ih sve.

Oksidirajuće nečistoće
Met in Retarotide is oxidized to sulfoxide, and we can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. We can control the oxidation conditions and synthesize the control product in oxidized state. The purity of the product is >95%, a možemo osigurati MS spektar za potvrdu stupnja oksidacije. Oksidacija je postupan proces i možemo postići dominaciju sulfoksida s nekoliko nus-proizvoda.

Dimer
Dimeri nastali unakrsno-vezivanjem ili ne-kovalentnom interakcijom mogu se pripremiti različitim metodama te izolirati i pročistiti kako bi se dobile kontrole visoke čistoće. Molekulska težina dimera dvostruko je veća od mase glavnog pika, što je poznato pomoću MS. Neki kupci su tražili dimer za validaciju metode, a mi smo im dali 98% čistoće.

Proizvodi za izbacivanje masnih kiselina
Ovo je nečistoća specifična za Retarutin. Lanci masnih kiselina mogu biti djelomično prekinuti ili potpuno odvojeni, što rezultira nizom povezanih nečistoća. Možemo sintetizirati različite varijante s nedostajućim ili skraćenim masnim kiselinama kako bismo vam pomogli da odredite mjesto tih nečistoća. Najsloženiji slučaj koji smo ikada napravili bio je kada nas je kupac zamolio da sintetiziramo varijantu lanca masne kiseline kojoj nedostaje šest atoma ugljika, i mi smo to učinili.

Deamidirane nečistoće
Za mjesta Asn i Gln u nizu, možemo pripremiti deamidirane kontrole nečistoća prisilnom razgradnjom ili ciljanom sintezom. Razlika u molekularnoj masi nakon deamidacije je samo 1, pa ih nije lako razlikovati pomoću MS, te je potrebno koristiti posebne kromatografske uvjete, koje možemo uskladiti.

Ostale prilagođene nečistoće
Ako u svom istraživanju pronađete novu nepoznatu nečistoću, možemo vam pomoći analizirati strukturu i sintetizirati je. Pošaljite nam uzorak, mi ćemo napraviti LC-MS analizu, nagađati strukturu, zatim usmjerenu sintezu, a zatim usporediti vrijeme zadržavanja i maseni spektar da potvrdimo dogovor. Proveli smo ovaj proces mnogo puta i stopa uspješnosti je prilično visoka.

Razvoj i validacija analitičke metode
Prilikom postavljanja HPLC ili LC-MS metode potrebna je kontrola nečistoća za lokalizaciju, odvajanje, linearni raspon i validaciju oporavka. Bez kontrole, validaciji metode nedostaje dio. Mnogi klijenti od nas traže da prvo napravimo nekoliko ključnih nečistoća kako bismo postavili metodu, a zatim polako nadoknadimo ostatak.

Heterogena masena spektrometrija
Prilikom deklariranja generičkog lijeka potrebna je sveobuhvatna kvalitativna i kvantitativna analiza procesnih nečistoća i produkata razgradnje. Mjesto, sadržaj i strukturu svake nečistoće potrebno je potvrditi kontrolnim proizvodom. Vidjeli smo da je deklaracija informacija poslana da se nadoknadi, devet puta od deset nečistoća ovog djela nije razumjela.

Studije stabilnosti
U-testima dugoročne stabilnosti i ubrzanim testovima potrebno je utvrditi koji su produkti razgradnje dominantni i kakav je trend sadržaja. Pomoću kontrole nečistoća moguće je točno kvantificirati i pratiti. Kada je kupac ispitivao stabilnost preparata Ritaglutida, utvrđeno je da vršna vrijednost razgradnje raste vrlo brzo u ubrzanim uvjetima, pa smo to analizirali pomoću MS-a i sintetizirali kako bismo potvrdili strukturu, a zatim je kupac s olakšanjem to prijavio nama.

Testiranje puštanja serije
Nakon komercijalizacije, svaku seriju API-ja ili formulaciju treba ispitati na predmetnu tvar. Kontrola nečistoća bitan je alat za ispitivanje otpuštanja. Bez toga se ne može reći tko je vrh i koliki je.

Podaci o generičkim deklaracijama lijekova
Studije nečistoća ključni su dio podataka o podnošenju. Pružite potpunu analizu profila nečistoća i podatke o kontroli, može značajno smanjiti rizik od procjene pitanja naknade. Stručnjak koji objavljuje informacije, imate cijeli set proizvoda za kontrolu nečistoća, potpune podatke, puno lakše.

Slučaj 1: farmaceutska tvrtka, program generičkih lijekova ritaglutida
Razvijaju generičku verziju ritaglutida i potreban im je kompletan set kontrola nečistoća za validaciju metode. Za njih smo prilagodili 8 nečistoća: 3 peptida koji nedostaju, 2 oksidirane nečistoće, 1 dimer, 2 proizvoda s pilingom masnih kiselina. Čistoća svakog od njih bila je iznad 95%, s MS podacima. Voditelj projekta je rekao: "Ne možemo kupiti te nečistoće i tražili smo nekoliko tvrtki koje to ne mogu učiniti. Ali uspjeli ste ih proizvesti sve, a podaci su bili potpuni, što je bila velika pomoć." Kasnije je njihova validacija metode uspješno dovršena, a dovršene su i informacije o deklaraciji.

Slučaj 2: CRO tvrtka, profiliranje nečistoća
Poduzeli su kvalitetan istraživački projekt o retalutidu, koji je zahtijevao sveobuhvatnu analizu procesnih nečistoća. Poslali su nam sirove uzorke peptida, a mi smo izvršili LC-MS analizu, zaključili moguće strukture nekoliko nepoznatih nečistoća, zatim ih sintetizirali na ciljani način, a zatim usporedili retencijska vremena i masene spektre kako bismo potvrdili tri nove nečistoće. Klijent je upotrijebio te podatke za poboljšanje spektra nečistoća i prošao prihvaćanje klijenta. Kasnije su nas zamolili da radimo nečistoće drugih vrsta.

Slučaj 3: Studije stabilnosti, biotehnološka tvrtka
Istraživali su stabilnost ritaglutida i otkrili da se količina produkta razgradnje brzo povećava u ubrzanim uvjetima, ali nisu znali što je to. Analizirali smo uzorak pomoću LC-MS i pretpostavili da se radi o nečistoći deamidacije na određenom Asn mjestu, a zatim smo je sintetizirali na ciljani način i potvrdili usporedbom. Uspostavili su analizu koristeći ovu kontrolu i točno pratili trend produkta razgradnje. Kada je predano konačno izvješće, podaci su bili vrlo solidni.

Retalutide je popularan proizvod, ali studije nečistoća su delikatan zadatak. Peptidi koji nedostaju, oksidirane nečistoće, proizvodi za eksfolijaciju s masnim kiselinama zahtijevaju specijalizirane kontrole za lokalizaciju i kvantifikaciju. Ako provodite kvalitetno istraživanje ili generički razvoj ritaglutida i trebate kontrolu nečistoća, slobodno nam se obratite. Puno smo radili, znamo koje su nečistoće teške i znamo kako to izvući.