Prilagođena izmjena peptida|Kemijska modifikacija peptida| Fluorescentno{0}}označeni peptid, fosforilirani peptid, spajani peptid|Znanstveni-peptid
Meta opis
Trebate peptide s posebnim modifikacijama? Znanost-PeptideCustom Peptide Modification usluga pokriva više od 200 vrsta modifikacija, kao što su fluorescentno obilježeni, fosforilirani, glikozilirani, PEGilirani, spojeni peptidi, itd. S 20 godina iskustva, u mogućnosti smo pružiti stabilnu isporuku složenih modifikacija. Slobodno nas kontaktirajte.
Trebate peptid s modificiranjem za svoje istraživanje? Pusti nas da to učinimo.
Zašto vam je potrebna prilagođena modifikacija peptida?
Prilikom istraživanja često trebamo dodati neke "posebne funkcije" peptidima - kao što je spajanje fluorescentne skupine da vidimo kako se odvija u stanici ili dodavanje fosforilne skupine da oponaša stanje aktivacije proteina ili stvaranje spojenog peptida kako bi struktura bila stabilnija i enzimi je ne bi lako razgradili. razgrađena enzimima.
Ove izmjene ne zvuče teško, ali kada dođe do njihove sintetizacije, postavlja se pitanje: jesu li mjesta modifikacija točna? Je li prinos dovoljan? Je li čistoća dovoljno dobra? Hoće li se višestruke modifikacijske kombinacije boriti?
Science-Peptide's Custom Peptide Modification service specijalizirana je za rješavanje ovih problema, s 20 godina iskustva u modificiranju peptida i više od 200 vrsta modifikacija, možemo pronaći pouzdane sintetske rute za jednostavno označavanje biotinom ili složene kombinacije više-modifikacije.
Ispod su neke od vrsta izmjena koje podržavamo (djelomičan popis):
|
Vrste izmjena |
Uobičajene izmjene |
Scenariji primjene |
|
Fluorescentno označavanje |
FITC (Fluorescein Isothiocyanate), FAM (Fluorescein Amidite), TAMRA (Tetramethylrhodamine), Cy3/Cy5, Rhodamine, Alexa Fluor serija |
Snimanje stanica, protočna citometrija, fluorescentna polarizacija |
|
Označavanje afiniteta |
Biotin, His-oznaka (histidinska oznaka), Flag-oznaka, HA-oznaka (hemaglutininska oznaka) |
Pročišćavanje afiniteta, pada{0}}analize i analiza SPR (površinske plazmonske rezonancije) |
|
Izmjene stabilnosti |
PEGilacija (modifikacija s polietilen glikolom), modifikacija masnih kiselina (npr. palmitinska kiselina, miristinska kiselina), modifikacija kolesterola |
Produljenje polu-života, poboljšana topljivost, poboljšana propusnost membrane |
|
Post-mimikrija izmjene prijevoda (PTM mimikrija) |
Fosforilacija (pSer: fosfoserin / pThr: fosfotreonin / pTyr: fosfotirozin), glikozilacija, acetilacija, metilacija |
Istraživanje signalnog puta, identifikacija supstrata enzima, interakcija protein-protein |
|
Strukturne izmjene |
Amidacija, ciklizacija, spojeni peptid (stabilizirani peptid kovalentnim povezivanjem) |
Stabilizirana konformacija, povećana otpornost na proteolizu, pojačana aktivnost |
|
Ugradnja neprirodnih aminokiselina |
D-aminokiseline, ne-prirodne aminokiseline, izotopsko označavanje (¹5N: dušik-15 / ¹³C: ugljik-13) |
Studije odnosa strukture i aktivnosti (SAR), NMR (nuklearna magnetska rezonancija) strukturna analiza, ispitivanje metaboličke stabilnosti |
|
Fotoosjetljive sonde |
Foto-umrežna skupina (Bpa: p-benzoil-L-fenilalanin), fotolabilna zaštitna skupina (Nvoc: nitroveratriloksikarbonil) |
Označavanje fotoafiniteta, foto{0}}kontrolirano otpuštanje, studije prostorno-vremenske specifičnosti |
|
Prekursori za radioaktivno obilježavanje |
DOTA (1,4,7,10-tetraazaciklododekan-1,4,7,10-tetraoctena kiselina), NOTA (1,4,7-triazaciklononan-1,4,7-trioctena kiselina) za kelaciju metala |
PET/SPECT snimanje (Positron Emission Tomography / Single Photon Emission Computed Tomography), razvoj radioterapijskih lijekova |
Zašto odabrati nas za prilagođenu modifikaciju peptida?
1. Više od 200 vrsta modifikacija, imamo u osnovi sve što vam padne na pamet.
Kupci nam često dolaze s literaturom i pitaju: "Možete li napraviti ovu preinaku?" Pogledamo ga, a najčešće je odgovor: "Uspjeli smo, a možemo i bolje." Zato što smo tijekom proteklih 20 godina skupili dovoljno iskustva i neuspjeha s ukrasima da znamo što funkcionira, a što ne.
2. Složene modifikacijske kombinacije? Puno smo ih rastavili.
Neki peptidi moraju imati nekoliko modifikacija u isto vrijeme: N-terminalno fluorescentno označavanje, intermedijarna fosforilacija, C-terminalna amidacija. Ovakva kombinacija je vrlo zahtjevna za strategiju sinteze, a jedan krivi korak dovest će do potpunog neuspjeha. Optimiziramo strategiju zaštite aminokiselina i uvjete spajanja kako bismo osigurali da je svaka modifikacija na pravom mjestu i da ne smeta jedna drugoj.
Istinita priča: kupac je želio sintetizirati 25 peptid s 3 modifikacije (fosforilacija + biotin + fluorescentno označavanje). Nakon što su pitali nekoliko tvrtki, ili su rekli da to ne mogu učiniti ili su rekli da će trebati najmanje 6 mjeseci. Nakon evaluacije, redizajnirali smo put sinteze i isporučili proizvod za 6 tjedana, s čistoćom većom od 92%, a kupac nas je čak spomenuo u zahvali kada je kasnije poslao članak.
3. Teške izmjene u kojima smo bolji
Višestruke disulfidne veze: do 4 para kako bi se osigurala ispravna orijentacija.
Klamani peptid: spojeni svi lanci ugljikovodika, poboljšavaju spiralnu stabilnost i prodiranje u stanicu.
Glikozilacija: O-konjugacija, N-konjugacija, složeni lanci šećera također mogu biti uključeni.
Hidrofobni dugi peptid: sam hidrofobni peptid, teže ga je otopiti modifikacijom? Za to se brine poseban sustav otapala.
4. Kontrola kvalitete nije formalnost, svaki peptid ima "osobnu iskaznicu".
Kontrola kvalitete modificiranih peptida problematičnija je od kontrole običnih peptida - ne samo da trebamo provjeriti je li molekularna težina točna ili ne, već također moramo potvrditi je li mjesto modifikacije navedeno. Rutinski pružamo:
MS/MS sekundarna masena spektrometrija: izravan dokaz da je modifikacija pričvršćena na mjesto koje želite.
HPLC analiza čistoće: čistoća je takva kakva jest, bez neistina.
Izborni testovi: sadržaj peptida, endotoksin, vlaga, analiza sastava aminokiselina, dodati po potrebi.
5. Od miligrama do kilograma, od istraživanja i razvoja do proizvodnje
Modificirani peptid ima dobre rezultate u fazi probira, a onda ga želite povećati za pokuse na životinjama ili čak klinički? Nema problema. Možemo dovršiti vezu od male količine do cGMP proizvodnje na istoj platformi, a metoda modifikacije procesa amplifikacije ostaje ista, što štedi probleme prijenosa procesa u kasnijoj fazi.
Što vam prilagođena modifikacija peptida može pomoći postići?
|
Smjerovi istraživanja |
Preporučene vrste izmjena |
Vrijednost izmjena |
|
Snimanje i praćenje stanica |
FITC (fluorescein izotiocijanat), TAMRA (tetrametilrodamin), Cy5, biotin |
Vizualizacija i lokalizacija, praćenje intracelularne distribucije peptida |
|
Studije prijenosa signala |
Fosforilacija (fosforilacija), acetilacija (acetilacija), metilacija (metilacija) |
Oponašanje stanja nakon-prijevoda radi proučavanja funkcionalnog utjecaja izmjena |
|
Provjera lijekova |
Stapled peptid, PEGilacija, modifikacija masnih kiselina |
Poboljšana stabilnost, propusnost i aktivnost |
|
Enzimska analiza |
Par za gašenje fluorescencije (FRET peptid: Försterov rezonantni peptid za prijenos energije), fosforilirani peptid |
-Praćenje aktivnosti enzima u stvarnom vremenu, probir inhibitora |
|
Razvoj cjepiva |
Glikozilacija (glikozilacija), lipidacija (modifikacija lipida) |
Povećana imunogenost, oponašanje prirodnih antigena |
|
Strukturna biologija |
Izotopsko označavanje (¹5N: dušik-15, ¹³C: ugljik-13), selenometionin (metionin supstituiran selenom) |
Studije NMR (nuklearne magnetske rezonancije) i kristalografije X-zraka |
|
Dijagnostički reagensi |
Biotin, fluorescentno označavanje, DOTA (1,4,7,10-tetraazaciklododekan-1,4,7,10-tetraoctena kiselina) |
Sonde za hvatanje, sonde za detekciju, sonde za snimanje |
Isporuka i kontrola kvalitete
Oblik proizvoda:liofilizirani prašak, epruvete za centrifugiranje ili štrcaljke.
Dokumentacija:Izvješće COA (s HPLC profilom i MS profilom), izvješće o sintezi (opcionalno).
Dodatni testovi:sadržaj peptida, vlaga, endotoksin, mikrobiologija, sastav aminokiselina, validacija sekvence - na zahtjev.
Razumijemo da kvaliteta modificiranog peptida izravno određuje uspjeh ili neuspjeh vaših naknadnih eksperimenata. Stoga, prije nego što se svaki peptid otpremi, više puta ćemo ga provjeravati kako bismo osigurali da je mjesto modifikacije ispravno, čistoća u skladu sa standardom i da se podaci mogu pratiti.
Tri stvarna primjera, pogledajte kako to koriste
Slučaj 1: Potražnja vrhunskog centra za rak
Oni žele peptid izveden iz p53 s dvostrukom modifikacijom (fluorescentno označavanje + fosforilacija) za proučavanje interakcija proteina. Problem je u tome što je sam peptid hidrofoban i gotovo netopljiv nakon dodavanja dviju modifikacija. Smislili smo način da uvedemo privremenu oznaku za solubilizaciju, a zatim je uklonimo nakon sinteze, i konačno smo dobili ciljani peptid. Naručitelj je pomoću njega napravio ključne podatke, a članak je objavljen u Cancer Cellu.
Slučaj 2: Europska biotehnološka tvrtka
Oni razvijaju lijekove-povezane s peptidima i moraju pričvrstiti otrovne molekule na određene položaje. Prvo smo sintetizirali modificirani peptid s ortogonalnim zaštitnim skupinama, a klijent je naknadno pričvrstio sam. Budući da točno kontroliramo mjesto modifikacije, oni imaju dobru selektivnost u povezivanju i prinos je veći od očekivanog.
Slučaj 3: Domaći istraživački tim
They need a batch of stapled peptides for antibacterial activity screening. The stapled peptides were difficult to synthesize and the yield was generally low. We optimized the introduction of olefinic amino acid and ring-closing conditions, and finally delivered a stapled peptide with purity >90% i prinos 30% veći od očekivanog, a probir aktivnosti je uspješno završen.
Više od samo modificiranih peptida, možemo učiniti mnogo više
Dobivanje visoko{0}}kvalitetnog modificiranog peptida često je samo prvi korak u istraživanju. Možda postoji još za slijediti:
Potvrdite aktivnost
Proširite sintezu za studije na životinjama
Razviti postupak za kliničke studije
cGMP proizvodnja za klinička ispitivanja
Znanost-Peptid može biti s vama cijelim putem. Ne prodajemo vam samo peptid, mi smo vaš tehnološki partner od otkrića do razvoja. Kada odaberete našu prilagođenu modifikaciju peptida, iza sebe imate tim koji razumije kemiju kao i biologiju.
Razgovarati o svojim potrebama?
Recite nam svoje informacije o slijedu (ili ciljanu pozadinu), vrstu modifikacije koja vam je potrebna, količinu i zahtjeve za čistoću. u roku od 24 sata primit ćete profesionalnu povratnu informaciju o izvedivosti i ponudu.
